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細胞の染色と顕微鏡観察
| 【使用器具】 | バット ピンセット 顕微鏡 スライドガラス カバーガラス |
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| 【ポイント】 | もっとも一般的な組織染色法です。 ●ヘマトキシリン液:A液(ヘマトキシリン 1.0g、エタノール 10ml) B液(カリミョウバン 50g、ミリQ水 800ml) A液とB液とヨウ素酸ナトリウム 0.2gを加え、 1時間後グリセリン200mlを更に加える。 ●エオジン液: 保存液(ミリQ水 100ml、エオジンY 1.0g、エリスロシン少々) 使用時に保存液を80% ethanolで4倍に希釈し、10%酢酸を1ml入れる。 |
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| 【材料】 | 50% ethanol 70% ethanol 80% ethanol 90% ethanol 95% ethanol 100% ethanol キシレン パラフィン エオジン液 ヘマトキシリン 封入剤 |
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| 【工程】 | ①パラフィン切片を染色篭に並べて入れ、以下の液に順番に浸けていく。 キシレン 100% ethanol 90% ethanol 80% ethanol 70% ethanol 50% ethanol ②バットに張った水で水洗し 脱パラフィンされているか確認する。 ③ヘマトキシリンにつけた後流水で水洗(直接あたらないように)。 ④エオジン液に5、6回つけた後、軽く水洗 (作業手順があり、それぞれの作業に時間指定があります) 50% ethanol 70% ethanol 80% ethanol 90% ethanol 95% ethanol 100% ethanol キシレン ⑤封入剤(マリノール)をカバーガラスに少量たらし 空気を入れないように組織切片を覆う。 ⑥乾燥後、検鏡。 |
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| 【注意】 | ④の作業時間は正確に行う。 脱色されすぎてしまいます。 |
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