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微生物の染色検査を体験!
| 【使用器具】 | 光学顕微鏡 スライドガラス カバーガラス ガスバーナー 白金耳 |
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| 【ポイント】 | グラム染色は細菌を濃い青紫色に染まるグラム陽性菌と, 薄い赤色に染まるグラム陰性菌に染めわけることができる. 陽性菌にはブドウ球菌,レンサ球菌,クロストリジウム属等があり グラム陰性菌に含まれるものには腸内細菌,ビブリオ,緑膿菌などがある. |
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| 【材料】 | Huckerのグラム染色液 ルゴール液 サフラニン溶液 95%エタノール サンプル菌株 |
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| 【工程】 | ① スライドグラスに水を滴下する。 ② 白金耳または滅菌した楊枝に菌を含むサンプル(菌コロニー,便,歯垢など) を付着させ水,生食とよく混ぜて均一にしてグラス面に塗り広げる ③ 室温または培養室に放置して十分に乾かす. ④ 塗抹面を上にしてブンゼンバーナーの炎の中をゆっくりくぐらす(火炎固定) ⑤ハッカー液をスポイトで数滴たらして、30-60秒染色 ⑥塗抹面を下にして,水道水で軽く水洗して水をよく切る. ⑦ルゴール液を30-40秒作用させる. ⑧水道水で軽く水洗して水をよく切る. ⑨アルコール入りのビーカーの中でスライドグラスを 7-8回シャブシャブの要領で左右に振り脱色する. ⑩サフラニン液で30-60秒対比染色す ⑪軽く水洗する ⑫室温または37℃培養室で十分に乾燥する. ⑬全て油浸レンズを用い,1000倍以上で観察する |
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| 【注意】 | 手早く水洗いしてアルコールを除き,脱色しすぎないようにする. 培養が古いグラム陽性菌はグラム陰性に染まる傾向があるので,染色には新鮮な培養液を用いる. |
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