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植物の細胞融合に挑戦
| 【使用器具】 | ピンセット 恒温槽 パスツールピペット 三角フラスコ(100ml) カミソリ ビーカー 薬さじ アスピレーター 時計皿 |
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| 【ポイント】 | 酵素は変質しやすいため、冷蔵庫内で保存する。 |
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| 【材料】 | 葉 酵素液 細胞融合液 |
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| 【工程】 | 1.試料の葉の刻み方 葉の中心の葉脈を切り取り、除去し 残りの葉を小さい葉脈に沿って幅10~20mmに切り取る。 次に、これらを重ねカミソリでできるだけ葉脈に直角になるよう切り 2mm幅の切片をつくる。 2.酵素液作用 ① 切り取った材料を1g三角フラスコ(100mg)に入れ 酵素液10mlを加える。 ② ガラス管のついたゴム栓をしてアスピレーターに接続。 空気を抜いていく。 ③30℃の恒温槽内で三角フラスコを振る。(約10分) 3.単離したプロトプラストの回収 ① プロトプラストが遊離している液を時計皿に取り 静かに机上でまわす。 ② 中心部に集まったプロトプラストを パスツールピペットでスライドガラス上に取り顕鏡する。 4.細胞融合 ①2種類のプロトプラストが遊離している液を時計皿に取り 静かに机上でまわす。 ② 細胞融合液を数滴加える。 |
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| 【注意】 | 実験に用いる植物はやわらかい葉をもったものが適している。 葉が薄く、毛が生えているものはあまり適さない。 |
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